Tirage de pipettes pour patch clamping

Aujourd’hui, nous allons découvrir comment tirer des pipettes utilisées en patch clamping, une technique du domaine de l’éléctrophysiologie. Pour cela, une machine qui tire les pipettes (les rend très pointues pour que la pointe puisse s’attacher à une cellule) est nécessaire. La machine en question est montrée en Fig. 1.

Fig.1 Machine à tirer les pipettes. La manette sert à régler la hauteur de la boucle. La boucle chauffe pour modeler le verre. Les vis servent à fixer la pipette.
Fig.1 Machine à tirer les pipettes. La manette sert à régler la hauteur de la boucle. La boucle chauffe pour modeler le verre. Les vis servent à fixer la pipette. Le stoppeur arrête la première descente de la boucle chauffante.
  1. Ouvrir la protection en verre.
  2. S’assurer que la manette est complètement tournée dans le sens des aiguilles d’une montre.
  3. Insérer la pipette pour ne laisser qu’un centimètre sortir au dessus de la vis supérieure.
  4. Insérer la pipette derrière la vis inférieure
  5. Serrer les vis supérieure et inférieure.
  6. Fermer la cage en verre.
  7. Positionner le stoppeur à gauche.
  8. Appuyer sur start.
  9. La boucle va chauffer et affiner le cylindre en son milieu.
  10. Attendre quelques secondes pour que le verre se resolidifie.
  11. Utiliser la manette pour positionner la boucle au milieu de la partie affinée.
  12. Déplacer le stoppeur à droite.
  13. Appuyer sur start.
  14. La boucle va chauffer et séparer le cylindre en deux pipettes pointues.
  15. Ouvrir la cage en verre et sortir les pipettes inférieure puis supérieure. Les sortir sur le côté et attention à ne pas endommager la pointe.
  16. Conserver les pipettes sur de la gomme d’architecte dans une boîte de Pétri (Fig. 2) ou passer au cirage (Fig. 3).
Fig. 2 Stockage des pipettes à patch clamp sur de la gomme d'architecte dans des boîtes de Pétri.
Fig. 2 Stockage des pipettes à patch clamp sur de la gomme d’architecte dans des boîtes de Pétri.
Fig. 3 Cirage des pipettes.
Fig. 3 Cirage des pipettes.

Remerciements

Merci au Dr. Ed Emery pour ses explications détaillées de la procédure.